Introducción teórica
El ADN se trata de un ácido nucleico que contiene la información genética necesaria para el desarrollo y el funcionamiento de cualquier ser vivo. También puede aparecer en algún virus.
La estructura del ADN fue propuesta por dos científicos, Watson y Crick, en 1953. Consiste en dos cadenas de polinucleótidos enrolladas a lo largo de un eje imaginario común, las dos cadenas son paralelas. Las bases nitrogenadas (Adenina, Guanina, Timina y Citosina) se dirigen hacia el interior de la doble hélice, mientras que las pentosas y los grupos fosfato forman el esqueleto externo. La estructura se mantiene estable gracias a los enlaces de hidrógeno que se forman entre los pares de bases nitrogenadas complementarias.
El ADN se encuentra en el núcleo de las células y es el portador de la información genética. Tiene capacidad de replicarse o duplicarse y esto permite que su información se herede, además las células utilizan el ADN para elaborar sus propias proteínas.
A lo largo de su vida las células tienen una fase de no división, dónde éstas crecen y se preparan para dividirse, y una fase de división, llamada mitosis, donde se duplica el ADN. Juntas forman el ciclo celular.
Las fases de la mitosis son:
Observación del ADN en etanol. Se trata de la pequeña área de color marrón (imagen de Víctor Amorós)
Confirmación o rechazo de las hipótesis
El ADN se trata de un ácido nucleico que contiene la información genética necesaria para el desarrollo y el funcionamiento de cualquier ser vivo. También puede aparecer en algún virus.
La estructura del ADN fue propuesta por dos científicos, Watson y Crick, en 1953. Consiste en dos cadenas de polinucleótidos enrolladas a lo largo de un eje imaginario común, las dos cadenas son paralelas. Las bases nitrogenadas (Adenina, Guanina, Timina y Citosina) se dirigen hacia el interior de la doble hélice, mientras que las pentosas y los grupos fosfato forman el esqueleto externo. La estructura se mantiene estable gracias a los enlaces de hidrógeno que se forman entre los pares de bases nitrogenadas complementarias.
El ADN se encuentra en el núcleo de las células y es el portador de la información genética. Tiene capacidad de replicarse o duplicarse y esto permite que su información se herede, además las células utilizan el ADN para elaborar sus propias proteínas.
A lo largo de su vida las células tienen una fase de no división, dónde éstas crecen y se preparan para dividirse, y una fase de división, llamada mitosis, donde se duplica el ADN. Juntas forman el ciclo celular.
Las fases de la mitosis son:
- Profase: La cromatina (forma que tiene el ADN sin condensar) se comienza a condensar para dar lugar a los cromosomas y los centriolos se van a los respectivos polos de las células para formar el huso acromático.
- Metafase: Los cromosomas ya están formados y los microtúbulos del huso acromático se unen al centrómero de las células.
- Anafase: Los microtúbulos de huso se acortan y tiran de las crómatidas que se separan y van a los respectivos polos.
- Telofase: Las cromátidas ya separadas se rodean de una membrana nueva, desaparecen los microtúbulos del huso acromático y se forman dos núcleos hijos.
- Papel de filtro
- Mazo de plástico
- Hoja de tomatera
- Tubos cónicos
- Gradilla
- Pipetas y puntas de plástico
- Centrifugadora
- Incubadora
- Vaso de plástico
- Rotulador permanente
- Tris(hidroximetilaminometano)
- Ácido etilendiaminotetraacético
- NaCl
- Detergente
- Acetato de potasio
- Isopropanol
- Acetato de sodio
Hipótesis
A partir de una hoja, gracias a un seguido de procesos tanto químicos como físicos se podrá extraer el ADN y observarlo pero a simple vista no se diferenciará la estructura exacta propia del ADN
Objetivos generales y específicos
- Extraer ADN de una hoja de tomatera.
- Observarlo y analizarlo.
- Aprender a realizar el proceso por nosotros mismos .
- Mejorar nuestras habilidades en el laboratorio.
Método de experimentación
- Se prepara el espacio de trabajo y se rotulan los tubos cónicos con nuestros nombres.
- Se extrae una hoja del tallo de tomatera y se introduce en el tubo cónico.
- Se vierte 250 ml de tampón de extracción (tris, EDTA y NaCl) al tubo cónico utilizando una pipeta automática.
- Con ayuda del mazo se tritura la hoja y posteriormente se añaden otros 250ml de tampón de extracción.
- Se añade 35mlde SDS con la ayuda de una pipeta de capacidad máxima 200ml.
- Se agita y se incuba durante 5 min a una temperatura de 65°.
- Se añade 130ml de acetato de de potasio y se vuelve a incubar 5 min pero esta vez a temperatura ambiente.
- Se centrifuga durante 10 min a una velocidad de 13.000rpm.
- Se extrae del tubo el sobrenadante evitando coger el precipitado con una pipeta de capacidad máxima 500ml.
- Al sobrenadante, que ahora se encuentra en un nuevo tubo, se le vierte 500ml de isopropanol y 60ml de acetato de sodio.
- Se incuba durante 10 min a temperatura ambiente.
- Se centrifuga durante 10 min a 12.500rpm.
- Se elimina el sobrenadante.
- Se añade 300ml de etanol a 70% y después se golpea el tubo suavemente.
- Se vuelve a centrifugar a 12.500rpm durante 5 min.
- Se observan y se analizan los resultados.
- Se recoge y se limpia el espacio de trabajo.
Obtención y análisis de los resultados
Observación del ADN en etanol. Se trata de la pequeña área de color marrón (imagen de Víctor Amorós)
Conclusiones
Es posible separar y extraer el ADN gracias a una serie de procesos físicos y químicos. El ADN de una hoja representa el 5% de su área total.
Errores de la práctica
- No se ultilizaron guantes o batas de laboratorio.
- Las cantidades no eran exactas del todo.
- Al extraer el primer sobrenadante también cogimos parte del precipitado.
Confirmación o rechazo de las hipótesis
Nuestra hipótesis fue confirmada ya que obtuvimos el resultado esperado
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